液相色谱柱的使用
更新时间:2016-09-26 点击次数:1681
液相色谱柱的使用:
色谱柱在使用前,进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。但要留意:柱性能可能由于所使用的样品、活动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是*条件),只有这样,测得的结果才有可比性。
1、样品的前处理:
a、使用活动相溶解样品。
b、使用予处理柱除往样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。
c、使用0.45μm的过滤膜过滤除往微粒杂质。
2、活动相的配制:
液相色谱是样品组分在柱填料与活动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求活动相具备以下的特点:
a、活动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保存在柱中)。
b、活动相具有一定惰性,与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。
c、活动相的黏度要尽量小,以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果;同时降低柱压降,延长液体泵的使用寿命(可运用进步温度的方法降低活动相的黏度)。