HILIC亲水液相色谱柱的使用及维护方法

HILIC亲水液相色谱柱亲水作用色谱是一种直接分离极性和亲水性化合物的色谱技术，它以亲水性的填料作为固定相，以水、有机溶剂和缓冲液作为流动相洗脱剂。在HILIC方法中，洗脱顺序和反相色谱正好相反，即极性越大，保留时间越长。

 

HILIC亲水液相色谱柱的使用及维护方法

在选择HILIC亲水液相色谱柱之前，先多了解自己的样品和杂质，他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等。

1.样品是极性的且弱酸性的；就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测，即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的HILIC亲水液相色谱柱。

 

2.如果样品极性太强，或酸性太强；可以选择CN，NH2，或硅胶柱，HILIC（亲水色谱），也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换HILIC亲水液相色谱柱（缺点是离子对试剂平衡时间长，对流动相pH要求比较精密，否则很难重复实验，另外离子对试剂很难洗下来，基本上用了离子对的HILIC亲水液相色谱柱就不能再用于其它实验）。

 

3.若样品是碱性的；可选择高纯硅胶柱（高纯硅胶缺少金属杂质，且硅胶端基封尾）或一些经过修饰的C18柱（如极性嵌入技术或碱去活技术等），他们都会减少碱性化合物的拖尾，一般会选择中性或偏碱的条件下做，因为这样可增加碱性样品的保留。

 

4.如果碱性化合物的极性太强，或碱性太强；可以选择宽pH的C18色谱柱在高pH值检测（优点是方法开发简单，缺点是目前实现这一技术的色谱柱品牌比较少，价格也高）或者选用HILIC色谱柱（硅胶柱在反相条件下使用，这也是很经典的检测碱性样品的方法）选择强离子交换柱（缺点是不能用来分析其它样品，对流动相pH要求比较精密，否则很难重复实验）也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换HILIC亲水液相色谱柱。