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大小分子个个出,只缘身在SEC柱中

更新时间:2019-07-05 点击次数:2709

 

根据供试品中分子量大小分离化合物的,较大分子量的化合物会被填料较小的细孔排除在外而达到分离称为体积排阻色谱法。当采用水溶液或者缓冲盐作为流动相的,称为凝胶过滤色谱法-GFC,当流动相是有机溶剂时,称为凝胶渗透色谱法-GPC。SEC是简单的色谱,其保留时间取决于溶质分子进出固定相孔结构的相对渗透性,供试品中不同化合物分子是根据体积不同来进行分离。

供试品中大分子不能进入凝胶孔洞,因而早被洗脱出来,中分子量的化合物分子能进入凝胶中一些较大的孔,因而在柱中的保留增强,洗脱时间延长,而小分子化合物可以进入凝胶中大部分孔洞,具有更强的保留,洗脱速度显著变慢,其中溶剂分子由于分子量小,在分离过程中会进入凝胶的所有孔洞,因而后被洗脱出来,从而达到不同分子量的化合物的分离。

月旭Xtimate SEC是硅胶基质的体积排阻色谱柱,采用*的化学键合技术,在硅胶表面键合了亲水性聚合物以及亲水性二醇基官能团,双重键合基质使得水溶性高分子聚合物蛋白、生物酶、多肽等生物样品的非特异性吸附很小,因而可以广泛应用于水溶性聚合物及生物大分子的分离和测定。

 

Xtimate SEC色谱柱的特性:

  • 由含二醇基官能团的刚性球形微球表面键合亲水性高分子聚合物所组成;
  • 色谱柱为5μm或3μm的硅胶微球,能够获得高的分离效率;
  • Xtimate SEC 120Å等小孔径的色谱柱适合分离头孢类等极性目标物,300Å适合分离蛋白、多肽等生物大分子;
  • Xtimate SEC产品有120Å、300Å、700Å和1000Å四种孔径规格的色谱柱。

 

在介绍完月旭的Xtimate SEC色谱柱之后,相信大家对我们这类产品的特性有了较深的了解,无图无真相,下面就让我们拭目以待吧。

 

头孢米诺钠和头孢地嗪钠聚合物杂质测定

色谱条件

色谱柱:Xtimate® SEC-120 (7.8*300mm,5μm)

流动相:0.005mol/L磷酸缓冲液(pH7.0)-乙腈=95:5

检测波长:254nm;流速:0.8ml/min;柱温:室温;进样量20μL。

 

1、头孢米诺钠

序列进样

样品溶液第1针

 

样品溶液第10针

 

样品溶液第100针

 

样品溶液第200针

 

重叠图谱

 

结论

 

从结果可以看出,200针后,主峰前杂质与主峰分离度为3.487大于1.50,满足方法要求。

 

2、头孢地嗪钠

序列进样

 

样品溶液第1针

 

样品溶液第10针

 

样品溶液第100针

 

样品溶液第200针

 

重叠图谱

 

结论

从结果可以看出,200针后,主峰前杂质与主峰分离度为2.943大于1.50,满足方法要求。

月旭Xtimate SEC*的键合技术,*的稳定性,不同的孔径大小能满足您不同的做样需求。选择Xtimate SEC,选择月旭,就是选择信任。

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