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c18固相萃取小柱的萃取过程和操作步骤
更新时间:2020-07-27 点击次数:9488
c18固相萃取小柱是一个包括液相和固相物理萃取过程。在固相萃取过程中,固相对分析物的吸附力大于样品基液。当样品通过SPE柱时,分析物被吸附在固体填料表面,其它样品组分基液通过柱子。用适当溶剂将样品洗脱下来,从而起到对样品的分离、纯化或浓缩作用。
操作步骤:
1)柱预处理(活化):预处理由两个目的“一是去除填料中可能存在的杂质,二是对填料溶剂化,展开碳氢链增加和分析物作用的表面积。填料溶剂化,提高结果的重现性对于反相填料来说,预平衡是必须的,即先用强溶剂润湿固定相,然后用弱溶剂加以平衡。
2)上样:把处理好的样品上柱,用正压或负压使样品通过柱子。样品的流速必需控制,对于生物样品,一般在1.5ml/min。对于以离子交换为作用机理的萃取,样品通过SPE柱的速度应该适当的降低,以保证分析物有足够的时间与SPE柱填料的离子交换功能团发生作用。
3)淋洗:选择合适溶剂,去除干扰杂质,使目标分析物得以保留。
4)洗脱:选择合适强度的溶剂洗脱目标分析物。
c18固相萃取小柱适用于可解离成带电离子的化合物,其机理是利用带电荷的目标化合物离子与带相反电荷的吸附剂之间的静电吸引力。样品基质可以是极性的,如水溶液,也可以是非极性的有机溶液,但在实际应用中以水溶液较多,包括生物体液、江河湖海等自然水、废水等。