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液相色谱柱在使用过程中易出现的问题教你解决办法
更新时间:2020-09-09 点击次数:1015
液相色谱柱在使用前,进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照出厂报告中的条件进行,只有这样,测得的结果才有可比性。
液相色谱柱在使用过程中易出现的问题和解决办法
在使用中常见的问题就是柱压升高,如果柱压是在长时间使用过程中缓慢增加,属于正常现象。但柱压在使用过程中突然升高(系统管路堵塞及压力传感器故障除外),可能的原因有如下几点:
(1)柱头的过滤筛板堵塞或污染;
(2)柱头的填料被样品污染;
(3)柱内缓冲液中的盐遇到高浓度的甲醇或其他有机溶剂,形成结晶析出;
(4)流动相pH值过大或过小使固定相结构破坏或溶解。
解决办法如下:
(1)如确定是液相色谱柱头的过滤筛板被污染,可以将反方向用甲醇冲洗至正常压力,或者卸下柱头,将其放在10%的稀硝酸内超声清洗10分钟,后再用纯水超声10分钟,重新装入。
(2)如确定柱头的填料被污染,将柱头螺丝卸下,挖出柱内前段被污染的填料,用相同的柱填料重新填入,仔细修复后,重新安装上柱头螺丝。
(3)如确定定是盐结晶,用10%的甲醇/水冲洗色谱柱使柱内盐全部溶解,再换高浓度甲醇。
(4)如果因pH值使用不当,很难恢复。