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高效液相色谱柱的再生过程是怎样的？
更新时间：2020-11-03 点击次数：1334
高效液相色谱柱采用内壁经过精密加工抛光的不锈钢管，以获得高柱效。不锈钢管耐溶剂、水和缓冲溶液的腐蚀，使用前色谱柱管先用甲醇和水依次清洗，再用50%的hno3对柱内壁作钝化处理。钝化时使hno3在色谱柱管中至少滞留10min，以在柱内壁形成钝化的氧化物涂层。也采用氟塑料、玻璃和玻璃衬里材料，主要是从抗腐蚀和易加工方面考虑。
高效液相色谱柱的再生：
因为色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的增加，当出现色谱峰峰高变低，峰宽加大或出现肩峰时，一般来说可能是柱效下降。
(1)、反相柱的再生，采用以甲醇:水=90:10(V/V),纯甲醇，异丙醇，二氯甲烷等溶剂作流动相，顺次冲洗，每种流动相流经色谱柱的量为20~30倍色谱柱体积然后再以相反顺序冲洗色谱柱。
(2)、正相柱再生。顺次以正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇作流动相冲洗色谱柱。每步注意平衡溶剂的顺序，不要颠倒。每种流动相流经色谱柱的量为20-30倍柱体积(因异丙醇的粘度较大，冲洗过程中请注意调整冲洗的流速)，用甲醇冲洗完后，再以相反的顺序冲洗色谱柱。要注意上述溶剂必需严格脱水。另外，请清洗前严格熟读色谱柱说明书，了解哪些溶剂不可用。
(3)、离子交换柱的再生。长时间在高pH值和高离子强度缓冲溶液中使用，将导致色谱柱离子交换能力降低。用稀酸缓冲溶液冲洗，可使阳离子柱再生;反之，用稀碱缓冲溶液冲洗，可使阴离子柱再生。
以上色谱柱的再生方法并不是的标准方法，使用者可根据自己的实际经验和目的，选择合适的并能溶解柱内污染物的溶剂作流动相，按正方向或反方向的冲洗。
