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糖检测色谱柱的结构与注意事项
更新时间:2020-12-16 点击次数:1534
糖检测色谱柱由于结构不同的高分子杂质通常具有相似的生物学特性(如均为过敏性杂质),因此在药品质量控制中一般只需控制药品中高分子杂质的总量而不必控制不同结构的杂质。因此根据样品分子量差异进行分离的凝胶色谱法具有明显的优势。
糖检测色谱柱的注意事项:
1、流动相手动混合在一个瓶子中,使用一个通道,过滤后超声脱气10分钟,尽量使用在线脱气机;
2、温度和流动相比例的微小改变都会导致基线变差,故柱温尽量保证柱头端和柱尾端一致。建议进样前用手触摸一下柱身(小心不要烫伤),如果差异大,使用干毛巾或者脱脂棉进行色谱柱的包裹,以保证良好的柱温。色谱柱管传递过来的温度明显没有45℃的话,可以将流动相用水浴或者加热套预加热;仪器的任何部件不要被风直吹(有时人员走动都会有影响);
3、RID检测器的温度比柱温小5℃比较好,避免温差太大导致基线噪音增加;
4、进样体积对柱效影响较大,严格按照药典进样10微升,如果峰面积太小,可以增加样品浓度,并且手动进样器的死体积小于自动进样器;
5、如果噪音一直很大,建议使用流动相冲洗色谱柱30分钟后,将废液端的出口将流出液返回到流动相瓶子中,冲洗参比池,循环12小时,整个过程仪器的设置和做样条件设置一致,实验室空调正常开启。