进出口水产品中亚甲基蓝残留量检测方法

一、适用范围

本标准规定了水产品中亚甲基蓝残留量测定的高效液相色谱检测方法。
本标准适用于鱼、虾及其制品中亚甲基蓝残留的测定和确证。（本实验样品为龙利鱼）
参考标准：《SN 1974-2007 进出口水产品中亚甲基蓝残留量检测方法  液相色谱-质谱/质谱法和高效液相色谱法 》

二、提取步骤

样品前处理：将样品经搅拌机搅碎，冷藏保存，备用。
准确称取5g鱼肉试样（j确至0.01g）于50mL离心管中，加入5g中性氧化铝，再依次加入1mL对甲苯磺酸溶液、4mL乙酸钠缓冲溶液，涡旋1min。加入8mL乙腈，10000r/min均质2min，4000r/min离心5min，将上清液转移到另一个50mL离心管中，再加入4mL乙腈重复提取残渣一次，合并上清液。然后在上清液中加入8mL二甘醇溶液，10mL二氯甲烷，涡旋1min，4000r/min离心5min，收集下层有机层于浓缩瓶中，在40℃下减压旋转蒸发至近干，加入6mL乙腈溶解残渣，待净化。

三、净化步骤

SPE柱：月旭Welchrom® Alumina-N小柱，规格：500mg/3mL。
活化：3mL乙腈，弃去；
上样：待净化液全部上样，收集；
淋洗：2mL乙腈，收集；
洗脱：4mL甲醇，收集；
浓缩：40℃氮吹至近干后用10%甲醇溶液定容至1mL，过0.22μm微孔滤膜，供上机检测。

四、色谱条件

高效液相色谱条件
色谱柱：月旭Ultimate® XB-C18 4.6×150mm，5μm；
洗脱程序：梯度洗脱，0min时，甲醇与0.1%甲酸水体积比为10:90；7min时，甲醇与0.1%甲酸体积比为95:5；9min时，甲醇与0.1%甲酸体积比为95:5；12min时，甲醇与0.1%甲酸体积比为10:90；15min时，甲醇与0.1%甲酸体积比为10:90；
流速：0.5mL/min；
柱温：30℃；
进样量：50μL；
检测波长：655nm。

五、色谱图或者加标回收率结果

六、相关产品信息