高压液相色谱柱主要由不锈钢制成。
现在流行两种主要的液相色谱柱的式样,关键部件卡套有些不同。
一种式样是螺母、卡套全套在柱管上,分配器和烧结过滤板按顺序放在尾部接头内。拧紧螺母和尾部接头,卡套一次成型紧紧咬住柱管外壁,起到很好的密封作用。分配器使得高压流动相不集中在一点冲击柱床,又能把由流动相带来的样品分散到柱头上均匀分离,形成对称的色谱峰。烧结过滤板的孔径<5微米,除了能缓和高压流动相对固定相的冲击,也挡住了污染物进入色谱柱柱头。
另一种式样的液相色谱柱的卡套是两片瓦形的不锈钢管,螺母上紧时可以密封,螺母松开时可以从柱管外壁拿下来。这种形式的液相色谱柱便于增加保护柱,而且死体积小。
高压液相色谱柱加装保护柱的作用:
保护柱的作用是过滤掉来自流动相和样品的化学“拉圾”同时也可以有效除去流动相和样品中的不溶物。尽管现在的色谱仪在流动相吸入口、进样阀后部以及在色谱柱的两端都装有1、2μm等不同孔径的滤器,但滤器只能除去不溶性颗粒而不能除去化学污染,因此,加装保护柱是必要的,特别是在分析中药、中成药等复杂混合物和生物样品时更是保护分析柱*的措施。
保护柱填料应与分析柱一致,粒径可较分析柱大。保护柱属消耗品,经过一定次数的样品分析(50~100次)后,出现柱压显著升高或峰形变坏或基线漂移时,应考虑更换保护柱。