液相色谱柱的保存
1.反向色谱柱实验后的保养:
用含盐缓冲液或流动相后,用10%甲醇/水冲洗30分钟,洗去色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。注意:不要用纯水冲洗塔,应在水中加入10%的甲醇,以防止填料倒塌。
2.长期保存色谱柱:
例如,色谱柱若要长期保存,必须保存在合适的溶剂中,反相柱可以储存在纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存在严格脱水的纯正己烷中。离子交换柱可以储存在水中(含防腐剂、硫柳汞),并在室温下堵塞插头。
液相色谱柱的再生
因为,色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说是柱效的下降。
1.反向柱的再生:
色谱柱以甲醇:水=10:90(V/V)为流动相,乙腈-异丙醇为流动相,色谱柱体积为甲醇:水=10:90(V/V)的20~30倍,流动相为乙腈-异丙醇。
2.正相柱的再生:
柱容为20×30倍,异丙醇(异丙醇粘度高,可降低流速,避免压力过大),二氯甲烷、甲醇为流动相冲洗柱,然后按反序冲洗。请注意,上述溶剂必须严格脱水。
3.离子交换柱的再生:
在缓冲溶液中长期使用和进样会导致色谱柱离子交换容量的下降。阳离子柱可以通过用稀酸缓冲液洗涤来再生,并且可以通过用稀碱缓冲液洗涤来再生阴离子柱。
特别说明:
再生过程中必须随时注意塔内压力的变化。过高的柱压容易导致硅胶的变形和开裂,导致键合相极性端键合顺序的紊乱。同时,必须确保再生时间充足。再生时,好选择无在线脱气的独立抽气系统色谱仪,以防止常相溶剂损坏汽提塔密封膜或仪器精密部件如分子筛、比例阀等。