液相色谱柱常见问题分析与解决方案

　　1.使用一段时间后柱压过高：
 

　　解决办法：首先，检查HPLC系统的原因是否合理，排除系统原因后，主要原因是实验过程中柱中杂质的积累。为了尽可能改善操作条件，样品应及时清洗，如缓冲盐流动相必须用较高比例的水溶液(如90%)清洗，然后用有机相保存。
 

　　2.筛板堵塞与柱头塌陷：
 

　　解决方案：如果确定色谱柱的滤板受到污染，则可用甲醇向相反方向清洗色谱柱至常压，或将色谱柱除去，并小心地除去筛板。超声处理用约5%硝酸溶液处理约20分钟，然后用纯水超声处理约20分钟，然后重新装入色谱柱。
 

　　3.色谱柱填料受样品污染：
 

　　解决方法：
 

　　如果确定色谱柱填料受到污染，则取下色谱柱螺钉，挖出色谱柱前部受污染的填料，再用相同的色谱柱填料填充。仔细修理后，重新安装上柱螺钉。
 

　　4。色谱柱中的缓冲液中的盐遇到高浓度的甲醇或其他有机溶剂，从而导致结晶和沉淀：
 

　　解决方法：
 

　　若确定为盐结晶，用10%甲醇/水冲洗柱，溶解全部盐，然后改变高浓度甲醇。