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如何正确使用BC-10脱盐柱
更新时间:2021-11-19 点击次数:3832
虽然我们都认为,唯有天才方能造出伟大的作品,但今天我想说,无名的工人同样能够制造出毫不逊色的杰作。
利用具有网状结构的葡聚糖凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。层析时,大于凝胶孔径的大分子,被阻于凝胶相外,沿着凝胶颗粒之间的间隙走,下移速度最快,故最先洗脱下来,中分子物质部分进入凝胶内部,洗脱速度为其次,而小分子物质因全部进入凝胶,受到阻力最大,故最后被洗脱下来,如此物质得到分离。
1.分辨率高,流速适中,易收集,耐酸耐碱耐高温,具有良好的稳定性;
2.一般生物大分子的分子量比盐等小分子大许多倍,用凝胶过滤方法为生物产品脱盐十分简单、可靠。
用于纯化分子量大于5,000 Da的蛋白质分子或替换成所需的缓冲液。
1.平衡:打开上下盖帽,柱里的保护液自然滴落,继续加入缓冲溶液,边滴边加,至少加3倍柱体积用来清除层析柱中的保护液。
2.进样:BC-10脱盐柱的最大进样体积为2mL,样品体积不足时,可以在样品*进入柱床体积后添加缓冲液到总体积2mL。为了增长填料的使用寿命,所用的样品推荐使用0.45微米的滤膜过滤。
3.洗脱:继续加入缓冲液进行洗脱。
——该层析柱虽是一次性使用,但是也可以重复再生使用。
1.去离子水洗5个柱体积;
2.0.5M氢氧化钠清洗2-3柱体积;
3.去离子水清洗3个柱体积;
4.再用20%乙醇洗柱5个柱体积。