疏水层析简介

疏水层析是根据分子表面疏水性不同来分离生物大分子的一种方法，和反相层析分离物质的依据是一致的，都是利用疏水介质的疏水性配基与流动相中的一些疏水分子发生可逆性结合而进行分离。根据蛋白质的疏水性差异，在高盐溶液中，蛋白质会与疏水配基相结合，而其他的杂蛋白则没有这种性质，可以将蛋白质初步的分离，用于蛋白质盐析之后的进一步提纯。

1. 采用了盐的水溶液作为流动相，色谱条件温和，生物大分子的活性回收率很高。

2. 蛋白质在HIC操作过程中是高盐上样，低盐洗脱（高盐浓度的样品不必作处理就可直接上样）。

3. 在一次色谱中可同时实现出去盐酸胍、蛋白质复性和分离三个目的。

4. 温度升高，蛋白质天然折叠伸展，暴露出更多内部疏水集团，使蛋白质的HIC保留发生变化。

5. 色谱填料稳定性好，盐水体系作流动相无环境污染。

一类盐（如Na₂SO₄、(NH₄)₂SO₄等）可以使溶液中蛋白质的构象稳定，会促进蛋白质自身间的疏水作用而析出，或者促进蛋白质与配基之间的疏水作用而保留在柱上，这类盐叫盐析性盐。盐析性盐的摩尔表面张力增量也大（除了有特异作用的盐如CaCl₂、MgCl₂外）。

有一些盐，如硫氰酸盐、盐酸胍等，会提高蛋白质的水溶性，同时会使蛋白质变性，这类盐叫盐溶性盐。盐溶性盐的摩尔表面张力增量小。

Phenyl/Butyl/Octyl/Butyl-S Tanrose FF

疏水层析介质

Phenyl Tanrose 6FF属于芳香族疏水介质，疏水性*。根据配基取代程度不同分为：高取代（High Sub简称HS）和低取代（Low Sub简称LS）两种介质。苯基通过不带电，化学性质稳定的醚键连接到琼脂糖上。

Butyl Tanrose 4FF和Octyl Tanrose 4FF这两种介质属于脂肪族疏水介质，Butyl Tanrose 4FF配基为丁基，Octyl Tanrose 4FF 配基为辛基：这两种配基通过不带电且化学稳定性的醚键同高度交联的琼脂糖偶联而成。

Butyl-S Tanrose 6FF是疏水性最弱的疏水介质，适合在较低盐浓度条件下纯化强疏水性分子，可去除脂肪类，脂蛋白，色素等，在酵母重组表达乙肝疫苗纯化过程中发挥重要作用。