蛋白质纯化的必要耗材和仪器

实验室中较常用的设备是离心机。蛋白质纯化实验室的主力是冷冻高速离心机，转速可达20000r/min。这种离心机在实验室中的实用性与其所配套的转子、离心管和离心桶种类的多少直接相关。从几毫升的离心管到500mL的离心桶所适用的转子都可以买到。大转子在蛋白质纯化早期步骤中处理大体积的提取物时是非常有用的。

如果想去除或制备亚细胞器，使用超速离心机是比较理想的手段。可以买到以80000r/min处理适当的大体积样品的离心机，市场上的一些较小机器的转速甚至更高。这些仪器的有效应用可以大大减少制备微粒体或高速离心分离上清液成分所需要的时间。鉴于这些仪器的高成本和低使用频率，它们通常在实验室之间共享。

许多微量分析技术的出现，使迷你离心机或微量离心机成为一种必bei的仪器。在蛋白质纯化实验室中，它虽然不是一个直接用于分级分离的装置，但却是一个必要的补充。基于这些考虑，大型离心机也经常用于不同类型的分析实验，而不仅仅是用于分级分离。

为了分离蛋白质，破碎细胞的装置是必需的。有各种仪器可达到这一目的，包括手动的和马达驱动的匀浆机、搅拌机、超声破碎器和压力元件等。一般情况下，个人实验室装备各种低成本的设备，其余的高成本仪器在实验室之间共享是比较合理的方案。

柱层析是大多数实验室所使用的一种主要的蛋白质纯化方法。进行蛋白质纯化的每个实验室应备有大量不同长度和直径的层析柱，以满足各种纯化目的的需求，因为在纯化规程的不断改进过程中，这些层析柱都可能会用到。应该备有各种不同精度等级的层析柱。我们发现，用注射器针头或管道进行液流输入和控制、装有塞子、简单的、重力引流且敞口的层析柱，已经可以满足绝大部分的色谱纯化过程。然后，在许多情况下，预装柱和加压的快速蛋白质液相层析（FPLC）系统可能是首xuan的设备。

一个可靠的组分收集器是实验室最重要的设备之一。组分收集器的故障可能导致数月的纯化工作被毁掉。在这种情况下，用多余的资金购置一个品质优良的、多功能的组分收集器是一种明智的选择。能加载大量的、不同尺寸规格的试管，拥有不同采集模式的收集器是最shi用的收集器。市面上有多种不同类型的组分收集器可供选择，在购买之前应仔细分析哪种型号可以满足预期需求。购买实验室仪器的一个合理的策略是购买一个更精密的仪器以满足某些情况下的特殊需求，并购买一个或多个低成本的简单仪器来满足日常使用。

柱层析的很多其他配件尽管不是必需的，但实用性很强，包括蠕动泵、各种规格的梯度仪和紫外线检测器。如果需要，梯度仪可以用烧瓶或瓶子自制。在色谱操作过程中，蛋白质洗脱图提供了重要信息。该信息可以通过使用分光光度计检测各部分洗脱物的吸收值或使用在线紫外线检测器的实时检测来获得。具有不同尺寸流动池的双波长模式的检测器的功能最多，也最昂贵。

最后，每个实验室都应备有最基本的色谱层析凝胶和树脂，包括阴离子和阳离子交换树脂、不同孔隙度的凝胶过滤介质、疏水层析凝胶或固相染料树脂。

每一个蛋白质纯化实验室都必须拥有自己的凝胶电泳设备。这些设备用于监测一个蛋白质的纯化过程，或用于分级分离本身。一般来说，配有不同尺寸垫片和梳子的垂直平板凝胶仪已经能够满足多数应用。电泳仪的电源供应器是必需的。如果只购买一个电源供应器，具有可调节的恒流（0-50mA）、恒压（0-200V）模式是很有用的。除了制备凝胶所需的化学药品之外，也应该备有多种蛋白质标准品和染色染料。用于凝胶电泳的仪器也可用于等电聚焦。

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