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一种更高效的层析方法--MMC
更新时间:2021-12-23 点击次数:2764
混合模式层析(mixed-mode chromatography,MMC)对功能配基的结构进行优化设计,组合两种或以上的相互作用模式,加强对目标蛋白的亲和性和选择性,从而提高纯化效率。与传统的IEC和HIC相比,新型层析模式MMC具有高载量、高选择性和高效率等优势。
MMC配基与目标蛋白之间存在多种相互作用模式,包括疏水作用、静电作用以及氢键作用等。
MMC介质的配基密度较高,且具有非盐依赖吸附特性,并可通过调节pH来实现蛋白的有效洗脱。
蛋白可与MMC介质所偶联的疏水基团和离子交换基团共同作用:当离子强度较低时,静电相互作用起主导作用;当离子强度较高时,则疏水相互作用占据主导作用;中等离子强度时,疏水和静电可能共同作用。
蛋白的洗脱通常有两个途径:当以疏水结合为主导时可以通过降低洗脱液pH,通过蛋白和配基之间的静电排斥作用来实现洗脱;当静电结合为主导时,则可通过增加离子强度从而减弱静电相互作用,实现蛋白的洗脱。
月旭科技现有两种复合型配基,MMC与MIX A,以下是产品的技术参数:
层析柱:TXK 50/30;
介质类型:Solid MMC;
样品:300M重组蛋白毕赤酵母发酵液;
平衡缓冲液:0.4M NaCl,20mM PB,pH6.5;
洗脱缓冲液:1.5M NaCl,20mM PB,pH6.5。
层析柱:TXK 50/30;
介质类型:Solid MiX A;
样品:300M重组蛋白毕赤酵母发酵液;
平衡缓冲液:0.1M NaCl,20mM磷酸缓冲液,pH7.0;
洗脱缓冲液:1.5M NaCl,20mM磷酸缓冲液,pH7.0。