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分离纯化的基本步骤

更新时间:2021-12-31 点击次数:6060

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每一种生物物质在结构、理化性质、生物学性质上千差万别,加之原材料的来源、最终产品的用途等也有所不同。因此,不同的生物物质有多种不同的分离纯化手段,即便是同一种物质,不同技术路线或生产线也可采取不同的分离纯化工艺。但大多数生物物质的分离纯化有一个基本框架,即常常按生产过程的顺序分为以下几个步骤。

原材料的预处理

该步骤的目的是将目标产物从起始原材料(如器官、组织或细胞)中释放出来,同时保护目标产物的生物活性。


颗粒性杂质的去除


由于技术和经济原因,在这一步骤中能选用的单元操作相当有限,过滤和离心是基本的单元操作。为了加速固-液两相的分离,可同时采用凝聚和絮凝技术;为了减少过滤介质的阻力,可采用错流膜过滤技术,但这一步对产物浓缩和产物质量的改善作用不大。


可溶性杂质的去除和目标产物的初步纯化


如果产物在滤液中,若要求通过这一步骤能去除与目标产物性质有很大差异的可溶性杂质,使产物浓度和质量都有显著提高,常需经过一个复杂的多级加工程序,单靠一个单元操作是不可能完成的。这步可选的单元操作范围较广,如吸附、萃取和沉淀。


目标产物的精制


该步骤仅有有限的几类单元操作可选用,但这些技术对产物有高度的选择性,用于除去有类似化学功能和物理性质的可溶性杂质,典型的单元操作有色谱分析、电泳和沉淀等。


目标产物的成品加工


产物的最终用途和要求决定了最终的加工方法,浓缩和结晶常常是操作的关键,大多数产品必须经过干燥处理,有些还需进行必要的后加工处理(如修饰、加入稳定剂)以保护目标产物的生物活性。




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