凝胶过滤色谱中的琼脂糖凝胶

基于凝胶过滤色谱的原理，对其介质的最基本的要求是不能与原料组分发生除排阻之外的任何其他相互作用，如电荷作用、化学作用、生物学作用等。理想的凝胶过滤介质具有高物理强度及化学稳定性，能够耐受高温高压和强酸强碱，具有高化学惰性，内孔径分布范围窄，珠粒状颗粒大小均一度高。目前常用的有葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等。

琼脂糖凝胶来源于一种海藻多糖琼脂，是一种天然凝胶，不是共价交联，所以氢键交联的键能比较弱。它与葡聚糖不同，孔隙度是以改变琼脂糖浓度而达到的。琼脂糖凝胶的化学稳定性不如葡聚糖凝胶。琼脂糖凝胶没有干胶，必须在溶胀状态保存，除丙酮和乙醇外，琼脂糖凝胶遇脱水剂、冷冻剂和一些有机溶剂即被破坏。用琼脂糖凝胶进行分离操作的适宜工作条件是pH4.5-9、温度0-40℃。琼脂糖凝胶对硼酸盐有吸附作用，不能用硼酸缓冲液。

琼脂糖凝胶颗粒的强度很低，操作时必须十分小心。另外，由于琼脂糖颗粒弹性小，柱高引起的压力能导致变形，造成流速降低甚至堵塞，所以装柱时应设法对柱压进行调整。琼脂糖凝胶没有带电基团，所以对蛋白类物质的非特异性吸附力明显小于葡聚糖凝胶。在介质离子浓度＞0.1mol/L时已不存在明显吸附。

琼脂糖凝胶的特征是能分离几万至几千万高分子量的物质，分离范围随着凝胶浓度上升而下降，颗粒强度却随浓度上升而提高，特别适用于核酸类、多糖类和蛋白类物质的分离，弥补了聚丙烯酰胺凝胶和葡聚糖凝胶的不足，扩大了应用范围。

Tanrose 4FF和Tanrose 6FF分别为4%和6%的琼脂糖经过乳化、漂洗、分筛而成的凝胶过滤介质，该介质具有良好的物理和化学稳定性，该介质既可采用氢氧化钠灭菌，也可以高压蒸汽灭菌。用于多糖、核酸、病毒、超螺旋DNA及大分子复合物的分离纯化或者检测。