高效液相色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成，压力不高于70bar时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效，减小管壁效应，不锈钢柱内壁多经过抛光。还有使用熔融硅或玻璃衬里的，用于细管柱。色谱柱两端的柱接头内装有筛板，取决于填料粒度，目的是防止填料漏出。
高效液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
如何更好的使用高效液相色谱柱，延长柱寿命？
1、拿到高效液相色谱柱后先阅读说明书，了解具体性能：耐受温度、耐受PH等。以及冲洗和保存条件。经过柱校测试确认本身没有问题后方可正常使用。
2、样品充分前处理，确保样品的洁净；使用保护柱或在线过滤器，根据实际情况更换保护柱芯或滤片。
3、避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。
4、应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中如果流动相中使用了缓冲盐，避免出现盐析。
5、选择使用适宜的流动相（尤其是pH），以避免固定相被破坏，PH过低共价键断裂，键和相水解；PH过高硅胶溶解。
6、使用过程中，如果压力升高，或出现污染，选择适当的条件冲洗或反冲。
