色谱柱填料板结原因剖析及解决方案

更新时间：2022-10-28 点击次数：1029

在色谱柱使用过程中，会出现柱压高，峰形差等现象，其主要原因是色谱柱填料污染导致的，其中填料板结是填料污染中特殊的一种，下面将对色谱柱填料板结进行原因剖析及解决方案。

填料板结的表现

色谱柱填料板结，色谱柱打开后会发现，填料颜色不变，但填料成片状、块状、结晶等结块现象。

填料板结的原因分析及解决方案

1、盐析

解决方案：

1）不管是新色谱柱或已经使用过的色谱柱，使用含盐的流动相都先使用与流动相组成比例相同但不含盐的溶液进行冲洗置换（避免使用纯水），时间建议30个柱体积以上。

2）流动相置换，在方法开发过程中，多数情况会涉及不同缓冲盐体系和不同有机相体系的各种尝试，那么在调整、更换流动相组成的过程中，请务必充分考虑到不同种类缓冲盐的溶解情况。若不确定所使用的缓冲盐和有机相之间的互溶情况，可按照不同比例将二者混合，静置30min，观察底部是否有沉淀或絮状物产生。

3）梯度条件，当涉及缓冲盐-有机相梯度条件时，请确认缓冲盐在梯度条件中有机相最高点是否能够充分溶解。当然，不确定的时候也可以和上述方法一样，将缓冲盐和有机相按照梯度最高比例混合后静置，观察是否有沉淀产生。

2、流动相配制时间过久，流动相长菌，或乙腈等有机相时间过久产生絮状沉淀。

解决方案：流动相按需配制，纯水相流动相一次配制使用不超过12小时。其他含有机相流动相一次使用不超过24小时，也可根据实际情况调整流动相的保质期。

3、其他：如胶状，絮状等样品通过过滤无法去除，也会积压在筛板和柱头端，引起柱压升高。

解决方案：胶状，絮状样品通过工艺，前处理去除干净后再进液相色谱系统。