根据实验需求配制相应的流动相接入仪器的各个通路,并配制泵头和自动进样器的清洗溶液(10% IPA)。
打开泵、自动进样器、柱温箱和检测器模块的电源。
打开电脑,启动工作站,查看各模块的连接状态,断开检查器流路,用低流速启动系统,观察系统压力,排尽假期前保存的纯MeOH溶液,压力稳定,接入检查器流路。
开排气阀,单个通路排气泡,排完后记得旋紧。
设置流动相初始比例开始平衡;若流动相含有缓冲盐,请先用10%的有机相水溶液进行过渡,再换成仪器方法初始比例的流动相进行平衡。
执行自动进样器清洗命令,并将进样阀切换至Inject的状态进行平衡。
设置方法所需的柱温箱温度。
若使用VWD/DAD检测器,待泵开启约5min后再打开氘灯或钨灯,并设置检测波长等。
若使用FLD检测器,需设置池温、激发波长、发射波长、采集频率等。
若使用RI检测器:先打开冲洗阀(purge=on)冲洗参比池约20min,再关闭冲洗阀(purge=off),并设置池温和极性。
若使用ELSD-5450检测器,首先开启氮气压力到3.5bar,确保能持续供气,设置到高温,如80℃,冲洗25min左右。监测基线,待系统流路充分平衡后,基线正常稳定,可以开始进样分析。
开机后压力在一段时间逐渐变化(升高或降低),这往往是流动相在色谱柱内还没有平衡好、柱箱温度还没有恒定。如果仪器没有问题,只要多平衡一会就会稳定。若使用的是梯度程序,由于流动相的比例正处在变化中,压力也会跟随变化。
泵无压力,不过液,通常会出现在长假之后,我们排查一下,如果管路里有大段的空气,重新Purge之后还是不能正常过液,我们可以使用注射器吸出液体重新连接管路,如单向阀内宝石球粘滞问题,可更换单向阀阀芯或用甲醇超声后装回。
液相色谱仪开机后如果压力瞬间变化>3MPa,通常以下四种情况,可依次排查解决:
是否有气泡;是否有漏液;单向阀不良;或者泵工作相位不正确,可逐个排除。