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亲和层析填料种类众多,达四五十种,而新的亲和填料不断的被开发出来。亲和填料纯化原理主要是根据蛋白与配基之间的特异性结合的原理,将能与蛋白特异性结合的配基交联到填料上,就可以纯化特定的蛋白。亲和填料操作简单,纯化效果好,基本一步就可以将蛋白纯化成很好的纯度。现实分离纯化过程中,越来越多的蛋白的分离都在使用或者寻找亲和的方法。亲和填料种类众多,以下简单介绍几种常用的填料类型。
以蛋白为配基系列的亲和填料
(1)Protein A 和耐碱 Protein A 亲和填料
Protein A 是来自于金黄色葡萄球菌细胞壁的一种蛋白 ,可以特异性结合哺乳动物 IgG 的 Fc片段。因此,将 Protein A 蛋白交联到琼脂糖球上,就可以纯化哺乳动物抗体。本公司自主构建生产与天然 Protein A结构类似的重组 Protein A 蛋白,以及经过人工改造的可以耐碱的 Protein A 蛋白。根据配基 Protein A蛋白耐碱与否 , 可以将填料分为 rProtein A Welchrom 和耐碱 rProtein A Welchrom ,根据基球类型可分为 rProtein A Welchrom 4B、rProtein A Welchrom 4FF、rProtein A Welchrom Cap 和耐碱 rProtein A Welchrom 4B、耐碱 rProtein A Welchrom 4FF、 耐碱 rProtein A Welchrom Cap 等几种填料。
(2)Protein G 亲和填料
Protein G 是链球菌表面的一种细胞壁蛋白 ,可以特异性结合哺乳动物IgG 的Fc 片段 ,其亲和范围比 Protein A 广,尤其对抗体亚型有很好的纯化效果。被广泛用于腹水、细胞培养液以及 Fc 融合蛋白的纯化。
本公司主要的 Protein G 填料类型有 rProtein G Welchrom 4B和 rProtein G Welchrom 4FF 两种。
(3)Protein L 亲和填料
Protein L 是从马格努斯消化链球菌分离出来的能和免疫球蛋白特异性结合的蛋白质,与 A、 G 不同的是, Protein L 专一性结合抗体轻链部分。蛋白 L 结合更宽范围的抗体类大于蛋白 A 或 G 蛋白 L 结合所有抗体类,包括 IgG,IgM,IgA 的,IgE 和 IgD 的代表。尽管有很宽的结合范围内,蛋白质 L 不是一个通用的抗体结合蛋白。 L 蛋白结合仅限于那些含有κ轻链的抗体,在人类和小鼠抗体,抗体分子除了包含κ轻链,其余有ι轻链。例如,它结合人 VκI,VκIII 和 VκIV 亚型但不结合 VκII 亚型。
本公司主要的产品类型有 rProtein L Welchrom 4B 和 rProtein L Welchrom 4FF。